Улица появилась в начале XIX века. Первыми ее жителями были ремесленники-иностранцы, приглашенные в Харьков в связи с открытием университета В. Н. Каразиным,/— типографы, переплетчики, словолитчики, садовники. Затем по просьбе В. Н. Каразина и по рекомендации великого Гете, являвшегося почетным членом совета Харьковского университета, в город прибыли и поселились на этой улице несколько преподавателей университета. Улица была сначала довольно тихой, пустынной, на ней не строились торговые и ремесленные заведения. В 1885 году открылся технологический институт, и вдоль улицы начали возводить небольшие каменные дома. Затем было построено еще одно учебное заведение — коммерческое училище, появились магазины, доходные дома. В 1910 году ее замостили и проложили трамвайную линию.

В 1899 году в ознаменование 100-летия со дня рождения А. С. Пушкина улицу назвали именем великого русского поэта. Интенсивная застройка на Пушкинской началась в советское время. До Великой Отечественной войны на ней поднялись многоэтажные жилые дома, институты, комплекс студенческих общежитий. В годы войны улица была сильно разрушена, от некоторых зданий остались лишь груды щебня.

Сейчас Пушкинская улица — средоточие учебных, научных, медицинских учреждений, предприятий бытового обслуживания, магазинов. Время властно врывается в старый архитектурный ансамбль. Согласно генеральному плану развития города Пушкинская будет продлена до пробивки улицы Героев Труда, на участке от улицы Веснина ее расширят. На углу улиц Совнаркомовской и Пушкинской начато строительство станции третьей линии метрополитена. Между улицами Чайковского и Студенческой предусмотрено сооружение высотных жилых домов, а на стыке Пушкинской и Короленко начинается строительство торгового центра. Первый этаж займет универсам, второй — универмаг, рядом расположатся подземная автостоянка, Дом юного техника.